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Abril de 2018 Página 2 de 7

Nuevas tecnologías en diagnóstico microbiológico: automatización y algunas aplicaciones

Beatrice Hervé E., MD

La optimización de los flujos de trabajo, en el pre analítico, los estudios de susceptibilidad y el post analítico, es clave para automatizar la microbiología.

Automatización del pre analítico

La inoculación automatizada de las diferentes muestras clínicas en la superficie de medios de cultivo que permitan el desarrollo de microorganismos aeróbicos, facultativos, fastidiosos y anaeróbicos, ha sido un punto largamente anhelado con el fin de lograr optimizar los flujos de trabajo. Existe hoy en el mercado diferentes equipos que abordan esta necesidad. Todos ellos intentan resolver problemas de calidad y estandarización de la estría o inóculo, contaminación cruzada, tiempo de procesamiento y costos. Al lograr una siembra con colonias bien aisladas, se reduce la necesidad de hacer traspasos y subcultivos, con el consiguiente ahorro en tiempo y reactivos. En términos generales, todos estos equipos utilizan muestras líquidas o en medio de transporte líquido. En la Tabla 1, se muestra una comparación somera de los principales equipos inoculadores disponibles en el mercado y sus características. [1,10]

Tabla 1. Sistemas de siembra automatizada

Nombre del equipo Fabricante / Proveedor Tipo de muestra Técnica de siembra
Inoqula BD Líquida Perlas magnéticas
Previ-Isola Bio Merieux Líquida Peineta
WASP Copan Líquida Asa

Automatización del analítico: identificación y estudios de susceptibilidad a antimicrobianos

El ideal actual consiste en la “automatización total” del laboratorio de microbiología, lo que comprende equipos en línea para siembra, incubación, análisis remoto de colonias desarrolladas mediante digitalización de imágenes y posterior identificación mediante espectrometría de masas (MALDI-TOF; Matrix Assisted Laser Desorption Ionization -Time of Flight) con realización de antibiograma automatizado a las colonias así identificadas. Todos estos equipos en línea estarían interconectados mediante un software que además comunica con equipos de hemocultivo automatizado, tinción de Gram y la realización de técnicas serológicas.

Si bien el ideal de automatización involucra el proceso completo del laboratorio de microbiología, la automatización total es un concepto aún lejano en la realidad de la mayor parte de los laboratorios. Lo que sí es posible en la actualidad, es contar con metodologías de identificación más rápidas que la convencional.

Identificación

Los procedimientos convencionales de identificación de microorganismos consisten en observación de características físicas y tintoriales (morfología de colonias, tinción de Gram) y de reacciones bioquímicas. Inicialmente, estas pruebas bioquímicas se realizaban en medios en tubos, los que con el tiempo se miniaturizaron en formatos que permitieron aumentar el número de pruebas y eventualmente automatizar la lectura de estos resultados. Dependiendo de las reacciones de cada microorganismo frente a diferentes sustratos, se obtiene un perfil bioquímico, que, al ser comparados con perfiles conocidos, facilita la identificación. [5,8,9]

El tiempo de la identificación convencional era de 24-48 horas para permitir la expresión de la reacción, ya que debía lograrse un número crítico de bacterias, que dependen de su velocidad de replicación. Con la automatización se logró reducir este tiempo a 8-10 horas, ya sea porque se detecta reacción con sustratos preformados, o se logra visualizar la reacción bioquímica con un menor número de replicaciones, dada la miniaturización de la reacción. Esta reducción en los tiempos exige la necesidad a contar con personal capacitado durante las 24 horas en el laboratorio, para optimizar y hacer más eficientes los procesos, aprovechando así las ventajas que ofrece esta tecnología más rápida. En la Tabla 2 se presentan los diferentes tipos de equipos y kits disponibles para identificación bioquímica. [11]

Tabla 2. Sistemas para identificación mediante pruebas bioquímicas

Metodología de identificación bioquímica Kits/equipos disponibles Automatizado Tiempo que demora
Observación visual de turbidez o cambio de pH, por utilización de diversos sustratos Paneles Api, Crystal, baterías convencionales No 15-24 hrs
Detección de cambios de pH por utilización de Hidratos de carbono, actividad enzimática, patrones de resistencia Tarjetas Vitek, Phoenix, Microscan tradicionales, Sensititre 8-12 hrs
Detección fluorométrica o colorimétrica de liberación de productos cromogénicos por reacción de enzimas preformadas MicroScan Rapid panels, BD Phoenix, Vitek, Trek diagnostic Systems 2-4 hrs


Palabras relacionadas:
Diagnóstico de laboratorio, Microbiología, automatización, identificación microbiana, estudios de susceptibilidad, la automatización del laboratorio de microbiología, identificación bacteriana y los estudios de susceptibilidad, verificación de la tecnología MALDI-TOF, protocolos publicados para urocultivo y hemocultivo.

Acerca del autor

Beatrice Hervé E., MD

Microbióloga. Médica Consultora del Laboratorio de Microbiología de la Clínica Las Condes, de Chile.
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