Cómo conseguir agua de calidad óptima en el laboratorio usando una fuente fiable de agua purificada

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Resumen

La calidad del agua en el laboratorio es una de las principales preocupaciones de quienes intentan llevar a cabo experimentos precisos y eficientes. La etapa de ultrapurificación que produce agua de tipo I, o ultrapura, suele recibir una gran atención, ya que este tipo de agua se utiliza en aplicaciones «cruciales» del laboratorio. Sin embargo, el proceso global de purificación del agua implica no solo la etapa de ultrapurificación final, sino también una fase de pretratamiento. Dado que en esta última se elimina la mayor parte de los contaminantes que hay en el agua del grifo, solo puede conseguirse agua de calidad óptima en el laboratorio si es posible confiar en que la etapa de pretratamiento produzca agua purificada que satisfaga las especificaciones.

En este artículo se presentan datos científicos que respaldan la recomendación de elegir, frente a otras tecnologías, una combinación de ósmosis inversa (RO, por su sigla en inglés) y electrodesionización (EDI) para la producción de agua purificada. Se presentan y comentan los resultados de experimentos que demuestran la influencia de la fuente del agua purificada sobre la calidad del agua ultrapurificada (llamada también agua ultrapura o de tipo I).

Introducción

El agua purificada es esencial en todos los laboratorios. Además de utilizarse para lavar el material de vidrio y preparar disoluciones para ensayos no cruciales, sirve también como agua de alimentación para los sistemas que producen agua ultrapura. El agua ultrapura se utiliza en las aplicaciones o experimentos cruciales, como la LC-MS, la cromatografía iónica y la ICP-MS, por nombrar unas pocas. En muchos laboratorios se desatiende el proceso de producción de agua purificada, lo que afecta gravemente a la calidad del agua ultrapura. Para ilustrar esta cuestión, se comparó mediante cromatografía de líquidos de alta eficacia (HPLC, por su sigla en inglés) la calidad del agua ultrapura procedente de sistemas de purificación idénticos alimentados con dos fuentes diferentes de agua purificada. Los resultados se muestran en la Figura 1.

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Figura 1. Cromatogramas UV del agua ultrapura que se produjo a partir de dos fuentes diferentes de agua purificada. Arriba: La procedencia del agua purificada era la desionización de servicio (SDI). Abajo: La procedencia del agua purificada era una combinación de ósmosis inversa y electrodesionización. Se utilizaron sistemas de purificación idénticos.

En la Figura 1 puede observarse que, aunque se utilizaron sistemas de ultrapurificación idénticos, la calidad del agua ultrapura no era la misma. El cromatograma superior muestra un pico a los 15 minutos, lo que sugiere contaminación orgánica. El pico de contaminación está ausente en el cromatograma inferior, lo que indica una mejor calidad del agua ultrapura. La única diferencia en las muestras de agua ultrapura era la procedencia del agua purificada que alimentaba al sistema de ultrapurificación. Es evidente que el pretratamiento usado para el cromatograma superior no eliminaba de manera eficaz los compuestos orgánicos. Los resultados del sencillo experimento que se acaba de describir sugieren una verdad muy importante que suele ignorarse en muchos laboratorios: el proceso de producción de agua purificada es crucial para conseguir una calidad óptima del agua de laboratorio. El proceso de producción de agua purificada se denomina también «pretratamiento». En un sistema completo de purificación de agua en un laboratorio, es decir, desde el agua del grifo hasta el agua ultrapura, la etapa de pretratamiento elimina el 95-99% de los contaminantes originalmente presentes en el agua (Figura 2). Claramente, un pretratamiento ineficaz afectará a la eficiencia y la productividad del laboratorio.

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Figura 2. Proceso de purificación completo en el laboratorio. La etapa de pretratamiento produce agua purificada y elimina el 95-99% de los contaminantes originalmente presentes en el agua del grifo. El agua purificada puede ser de tipo II o bien de tipo III, dependiendo de la tecnología usada en el proceso de purificación. La de tipo III es de menor calidad y suele obtenerse mediante ósmosis inversa (RO). El agua de tipo II se produce utilizando una sola tecnología (por ejemplo, destilación, desionización) o combinando varias tecnologías (ósmosis inversa más desionización, por ejemplo).

Tecnologías de purificación del agua usadas para producir agua purificada (pretratamiento)

El agua del grifo contiene un amplio espectro de contaminantes en concentraciones elevadas, lo que permite que no sea adecuada para su uso en el laboratorio. Esos contaminantes se clasifican normalmente en grupos: partículas, iones, compuestos orgánicos y bacterias. A lo largo de los años se han utilizado diversas tecnologías para retirar esos contaminantes del agua. Cada tecnología tiene sus ventajas y sus limitaciones. Algunas pueden quitar una gran fracción de diversos tipos de contaminantes, mientras que otras destacan en la eliminación de solo un tipo específico de impurezas. Por tanto, es necesario usar una combinación de tecnologías para eliminar todos los contaminantes hasta la concentración deseada.

Destilación - La destilación es probablemente el método más antiguo de purificación del agua. Elimina una amplia gama de contaminantes y, por tanto, es útil como una primera etapa de purificación. Sin embargo, consume una gran cantidad de agua del grifo (para enfriar) y de energía eléctrica (para calentar). Además, una parte de los contaminantes es transportada al condensado, y se requiere un mantenimiento meticuloso para asegurar la pureza del agua. El uso de la destilación para purificar el agua ha ido disminuyendo con los años.

Ósmosis inversa (RO) - La ósmosis inversa es capaz de retirar la mayor parte de una amplia variedad de tipos de contaminantes, aunque la eficiencia de la RO varía de un tipo de contaminante a otro. Por consiguiente, es útil como primera etapa en el proceso de purificación. En la Tabla 1 se muestra el rechazo iónico de las membranas de ósmosis inversa utilizadas en los sistemas de purificación de agua Merck Millipore.

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Tabla 1. Muestra de rechazo iónico de una membrana de RO. Las concentraciones se expresan en μg/l. Se miden promedios de 3 meses.

En un sistema de purificación de agua, es importante que la membrana de ósmosis inversa esté protegida de las impurezas del agua del grifo que podrían dañarla. Por tanto, suele instalarse antes de la RO un cartucho que las retira. Este cartucho contiene un filtro de profundidad que retira las partículas gruesas, fosfatos para reducir la dureza del agua y carbón activado para eliminar el cloro y las cloraminas.

Resinas de intercambio iónico - Las resinas de intercambio iónico retiran con eficacia los compuestos inorgánicos disueltos (iones) y los compuestos orgánicos cargados, pero no los compuestos orgánicos neutros, las bacterias ni las partículas. Cuando están ocupados todos los sitios de unión a los iones de las resinas, dejan de retenerse aquellos (excepto en el caso de la electrodesionización o EDI). En los sistemas de desionización convencionales (SDI), las resinas pueden regenerarse usando ácidos y bases fuertes. Los lechos de DI regenerados químicamente pueden introducir en el agua purificada compuestos orgánicos y partículas.

En los sistemas SDI, los medios de tratamiento del agua están contenidos en tanques portátiles de varios tamaños que están conectados al suministro de agua del grifo. Los tanques pueden contener resinas de intercambio de cationes, resinas de intercambio de aniones, resinas de lecho mixto y, a veces, carbón activado granular. Cuando la calidad del agua cae por debajo del punto de referencia, los tanques de desionización (DI) se cambian por tanques con resinas de intercambio iónico recién regeneradas que se han procesado fuera.

Nota: Para la etapa final de producción de agua ultrapura se usan resinas de intercambio iónico de un solo uso. Estas resinas se caracterizan por su gran capacidad de adsorción, su rápido intercambio iónico y su baja liberación de compuestos orgánicos. Dado que se trata de resinas de un solo uso, no se plantean problemas relacionados con su regeneración química.

Electrodesionización (EDI) - Esta tecnología es una combinación de resinas de intercambio iónico, membranas semipermeables selectivas (aniónicas y catiónicas), y corriente eléctrica continua. El proceso de EDI desioniza eficazmente el agua, mientras las resinas de intercambio iónico son continuamente regeneradas por la corriente eléctrica en la unidad. Esta regeneración continua aporta cuatro ventajas significativas a la EDI:

1. No hay fuga de iones, como sí ocurre en el intercambio iónico convencional cuando las resinas se saturan; por tanto, la calidad del agua se mantiene a un nivel constante y elevado de pureza.
2. La EDI utiliza regeneración no química, evitando contaminar el agua purificada con los compuestos orgánicos y partículas asociadas a la regeneración química convencional de las resinas.
3. Bajos costos operativos.
4. Beneficios ambientales, al eliminar la regeneración química.

Para trabajar de una manera óptima, el agua que entra en el módulo EDI debe estar pretratada; habitualmente es agua que ha pasado ya por una ósmosis inversa.

En la Figura 3 se comparan los cromatogramas de masas del agua purificada mediante EDI (electrodesionización) y SDI (desionización convencional), obtenidos en LC-MS. El agua EDI tiene unos pocos picos de muy baja intensidad, mientras que el agua SDI tiene numerosos picos de alta intensidad, lo que indica una cantidad significativa de contaminación orgánica.

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Figura 3. Cromatogramas de masas en 3D de agua purificada mediante (A) electrodesionización (B) desionización convencional. Carbón activado - En la purificación del agua se utilizan dos formas de carbón activado: natural y sintético. El carbón natural activado consiste en polvo fino compuesto por granos de forma irregular. Contiene una elevada concentración de contaminantes iónicos y, por tanto, se usa solo como una etapa preliminar en el proceso de purificación del agua para retirar el exceso de cloro del agua del grifo y, en cierta medida, reducir la contaminación orgánica. El carbón activado sintético se fabrica mediante pirólisis controlada de microesferas de poliestireno, y es un material mucho más limpio. Se utiliza para retirar oligocompuestos orgánicos de bajo peso molecular, normalmente en la etapa de ultrapurificación para la producción de agua ultrapura.

UV germicida - La radiación ultravioleta se usa ampliamente como un tratamiento germicida para el agua. Las lámparas UV que emiten luz a 25 nm inactivan los microorganismos y evitan el crecimiento microbiano y la contaminación. La absorción de luz UV induce la modificación del ADN de las células bacterianas, inhibiendo su metabolismo y evitando así su multiplicación.

En la tabla 2 se resumen las ventajas y las desventajas de las diferentes tecnologías de purificación de agua que se acaban de comentar.

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Tabla 2. Ventajas y desventajas de las diferentes tecnologías usadas en la producción de agua purificada (tipo II)

Comparación de la eficiencia de las diferentes tecnologías en la eliminación de contaminantes: resultados de experimentos científicos

Ninguna tecnología por si sola puede eliminar con eficacia todos los contaminantes del agua. La ósmosis inversa se ha mencionado como una forma efectiva de eliminar una gran masa de un amplio abanico de contaminantes, pero las concentraciones de estos pueden seguir siendo excesivas para las aplicaciones de laboratorio. Por ejemplo, en la Tabla 3, un agua del grifo que tenía 12.905 ppb de sodio, seguía teniendo 668 ppb después de la RO. En otro experimento, el agua del grifo con 1410 ppb de TOC contenía 64 ppb de TOC después de la RO. Estos valores pueden ser aceptables para aplicaciones generales de laboratorio, pero con toda probabilidad no serán tolerados para experimentos que requieran agua de una calidad óptima.

Se prefiere una combinación de tecnologías para retirar con eficiencia los contaminantes del agua. La RO-EDI, combinación de ósmosis inversa y electrodesionización, constituye un pretratamiento muy potente. Proporciona agua purificada de forma constante y fiable. En la gama de sistemas como Elix, en la que se usan tecnologías RO-EDI, el agua del grifo se purifica a agua purificada en las siguientes etapas:

  • El agua del grifo atraviesa primero los cartuchos de pretratamiento que contienen carbón activado (para retirar los agentes oxidantes como el cloro y las cloraminas que deterioran las membranas de RO), un filtro (para retener las partículas gruesas) y polifosfatos (para reducir la dureza del agua).
  • El agua pasa después por la membrana de RO, que retiene la mayor parte de los contaminantes.
  • El agua RO se somete a una purificación ulterior mediante EDI, para producir agua de tipo II.

Comparación de la eficiencia de retención

En la Tabla 3 se compara la eficiencia de retención iónica de cada una de las tecnologías por separado (RO, destilación, SDI) y una combinación de ellas (RO-EDI). La etapa destilación sola produjo una mejor pureza iónica que la RO. Después de la RO, la concentración de iones seguía en el nivel de pocos ppb en el mejor de los casos, y de centenares de ppb, en el peor. Pero las concentraciones de los iones eran sumamente bajas con la combinación de RO y EDI, menores que con la SDI para la mayor parte de los iones y mucho más bajas que la destilación para todos los iones medidos.

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Tabla 3. Eficiencia de retención iónica de la RO, la RO-EDI, la destilación (dest.) y la SDI (valores mostrados en ppb) La pureza iónica del agua puede evaluarse en función de su resistividad. La resistividad teórica del agua ultrapura es de 18,2 MΩ.cm; por tanto, cuanto más cerca esté de este valor, menor será la concentración de contaminantes iónicos presentes en el agua. En un estudio, se comparó la resistividad del agua purificada mediante un sistema de desionización de lecho mixto (DI) y un sistema RO-EDI durante la producción de 2.000 litros de agua. La resistividad del agua DI era inicialmente elevada (18 MΩ.cm). Sin embargo, después de procesar 500 litros, se observó una caída significativa de la resistividad. La sustitución de los cartuchos de DI no restauró el valor elevado original de la resistividad. El sistema RO-EDI, por otro lado, produjo de manera constante agua de 15 MΩ.cm durante el experimento.

Comparación de la eficacia de eliminación de compuestos inorgánicos

La contaminación orgánica en el agua suele expresarse como carbono oxidable total (TOC). En la Tabla 4a se compara la reducción de los niveles de TOC usando tecnologías individuales: RO y destilación. El agua destilada tenía niveles más elevados de TOC, porque en el proceso de destilación, los compuestos orgánicos con puntos de ebullición menores de 100 ºC son transferidos de manera automática al destilado e incluso los compuestos orgánicos con un punto de ebullición ligeramente superior a 100 ºC pueden disolverse en el vapor de agua y pasar también al destilado. En otro grupo de experimentos, se demostró que la combinación de RO y EDI daba menores niveles de TOC que la destilación y que la SDI (Tabla 4b).

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Tabla 4a. Reducción de los niveles de TOC mediante RO y destilación (Dest.) (valores mostrados en ppb)

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Tabla 4b. Reducción de los niveles de TOC mediante RO-EDI, destilación (Dest.) y SDI (valores mostrados en ppb)

En un estudio se comparó la eficiencia de los cartuchos de desionización (DI) de lecho mixto y la RO-EDI en la reducción de los niveles de TOC.2 Se purificaron 2.000 l de agua del grifo. El agua DI exhibía valores inestables que fluctuaban entre 100 y 500 ppb (Figura 4). Por otro lado, el agua purificada mediante las tecnologías RO-EDI tenía valores de TOC que eran fundamentalmente < 50 ppb.

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Figura 4. Niveles de TOC en el agua purificada mediante un sistema de desionización de lecho mixto (DI) y un sistema RO-EDI.

Si bien no cabe esperar que la EDI tenga efecto alguno sobre las moléculas neutras, los compuestos orgánicos cargados (como los ácidos carboxílicos, los sulfonatos y los amonios) se comportan de forma similar a los iones inorgánicos y, por tanto, sí son eliminados por la EDI. Por consiguiente, el nivel de TOC disminuye ligeramente del agua RO al agua EDI y, en condiciones de funcionamiento normales, el nivel de TOC en el agua RO-EDI estaría constantemente por debajo de 50 ppb medidos fuera de línea (30 ppb medidos en línea).1

El impacto del pretratamiento en la calidad del agua de tipo I (ultrapura)

Muchos análisis, tanto de investigación como de control rutinario, dependen del agua ultrapura. Los avances en la instrumentación de laboratorio han reducido los límites de detección, reduciendo los niveles permitidos de contaminantes. Dado el gran aumento de la sensibilidad de las técnicas modernas, la pureza de los reactivos, entre ellos el agua, es crucial. Estos avances y los estrictos requisitos de muchos laboratorios, exigen una fuente fiable de agua ultrapura.

Como puede verse en la Figura 1, el agua ultrapura se produce ”ultrapurificando” el agua purificada. La calidad del agua purificada afecta seriamente a la calidad del agua ultrapura producida. Esto es, un proceso de pretratamiento fiable dará como resultado agua ultrapura de la mejor calidad. Dos ejemplos ilustran este hecho.

Ejemplo 1. Sistemas de pretratamiento comparados: (A) Desionización (DI) lecho mixto
  (B) RO-EDI
Unidad de ultrapurificación: Sistema Milli-Q

En este estudio se conectaron los sistemas de DI y RO-EDI a la misma fuente de agua del grifo. El agua purificada procedente de cada uno de esos sistemas se ultrapurificó usando unidades Milli-Q idénticas (Figura 5).

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Figura 5. Esquema de las cadenas de purificación del agua usadas en el Ejemplo 1 

Se registraron los niveles de TOC del agua ultrapura producida por cada uno de los sistemas Milli-Q, que se muestran en la Figura 6. El agua producida en el sistema A (alimentado por DI) tenía niveles elevados y fluctuantes de TOC, entre 50 y 150 ppb. El sistema B (alimentado por RO-DI) mostraba concentraciones de TO constantemente en torno a las 10 ppb. La elevada variabilidad en los niveles de TOC en el agua DI (Figura 4) tuvo como resultado niveles de TOC elevados y fluctuantes en el agua ultrapura vista en la Figura 6. La carga de TOC en el agua DI saturaba las etapas de purificación del equipo de ultrapurificación.

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Figura 6. Niveles de TOC en el agua ultrapura producida a partir de (A) agua DI y (B) agua RO-EDI

Ejemplo 2. Sistemas de pretratamiento comparados: (A) SDI-Dest
  (B) RO-EDI


Unidad de ultrapurificación: Sistema Milli-Q

En este estudio, se conectaron los sistemas de SDI-Dest y RO-EDI a la misma fuente de agua del grifo. El agua purificada procedente de cada uno de esos sistemas se ultrapurificó usando unidades Milli-Q® idénticas. En la Figura 7 se muestran los niveles de TOC del agua ultrapura producida por cada uno de los sistemas Milli-Q®. El agua producida en el sistema A (alimentado por SDI-Dest.) tenía niveles fluctuantes de TOC, entre 8 y 80 ppb. Esto es un reflejo de la inconstante calidad del agua obtenida mediante SDI-destilación. Por otro lado, el agua ultrapura obtenida a partir de agua RO-EDI mostraba constantemente niveles de TOC por debajo de 10 ppb.

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Figura 7. Niveles de TOC del agua ultrapura producida a partir de (A) agua SDI-destilación y (B) agua RO-EDI Los laboratorios que tengan fuentes de agua purificada similares a los ejemplos mencionados como “A”, sufrirán una calidad inconstante del agua. Sus resultados experimentales probablemente no sean de la mayor calidad y quizá tengan poca reproducibilidad, lo que contribuirá a pérdida de recursos. En el caso extremo, el sistema de purificación de agua podría fallar sin avisar, causando periodos de parada significativos en el laboratorio, y comprometiendo así su productividad.

Combinación de tecnologías en la etapa de ultrapurificación de agua

En el laboratorio, el agua purificada (de tipo II o de tipo III) se ultrapurifica para producir agua ultrapura, o de tipo I. El agua ultrapura se usa en experimentos que requieren concentraciones extremadamente bajas de contaminantes. Por ejemplo, los análisis de trazas de moléculas orgánicas polares mediante LC-MS requieren agua ultrapura con un nivel muy bajo de contaminantes orgánicos, ya que estos podrían afectar de diversas formas a la calidad de los datos. En la etapa de ultrapurificación, suelen combinarse tres tecnologías: resinas de intercambio iónico (un solo uso), carbón activado sintético y fotooxidación UV. Estas tres son necesarias para obtener y mantener niveles de TOC iguales o inferiores a 5 ppb en el agua ultrapura, como se muestra en la Figura 8. En este experimento, el agua RO se ultrapurificó usando dos módulos diferentes: IX y EX, donde los módulos IX contienen resinas de intercambio iónico y los módulos EX, resinas de intercambio iónico y carbón activado sintético. Como se muestra en el gráfico, la presencia de carbón activado sintético produjo menores niveles de TOC. Los niveles se reducían todavía más si se usaba fotooxidación UV (normalmente por debajo de 5 ppb de TOC).

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Figura 8. La ultrapurificación del agua purificada para producir agua ultrapura requiere la combinación de tecnologías para alcanzar bajos niveles de TOC. Se utilizan dos tipos de módulos: IX = resinas de intercambio iónico; EX = resinas de intercambio iónico + carbón activado sintético; UV = fotooxidación UV.

Visión de conjunto de la purificación y el control del agua

La eficiencia a largo plazo de los sistemas de purificación de agua en un laboratorio requiere una visión de conjunto. Elegir las mejores tecnologías sobre la base de un conocimiento sólido de la calidad y la cantidad del agua necesaria en el laboratorio no es más que el principio. Es igualmente importante que el personal de laboratorio esté entrenado en el uso y el mantenimiento apropiados de los sistemas, y que se realice un control regular de los parámetros de calidad del agua. Sistemas como los de Merck Millipore están equipados con capacidades de control de la resistividad y el TOC para que los usuarios puedan verificar que la calidad del agua liberada por un sistema está dentro de las especificaciones.

Resumen y conclusiones

Para asegurar una calidad óptima del agua de laboratorio, se requiere la mejor fuente de agua purificada (tipo II). Si bien existen diversas tecnologías de purificación, ninguna tecnología por si sola eliminará todos los contaminantes hasta concentraciones lo bastante bajas para su uso en el laboratorio. Por tanto, se recomienda usar una combinación de tecnologías. La mezcla de RO y EDI es la mejor opción para producir agua de tipo II. Las concentraciones iónicas y de TOC del agua RO-EDI son constantemente bajas, y cumplen con los requisitos de muchas aplicaciones generales de laboratorio, incluyendo su uso en analizadores clínicos, incubadoras de cultivo celular y cámaras climáticas. Además, la calidad constante del agua RO-EDI posibilita que sea la más adecuada para producir agua ultrapura con un equipo de ultrapurificación, como el sistema Milli-Q. El resultado es agua ultrapura con niveles constantemente bajos de iones y de TOC. Se ha demostrado que otras técnicas de obtención de agua purificada, como destilación, SDI e incluso la combinación de SDI y destilación, producen agua ultrapura con niveles fluctuantes de contaminantes. Dicha fluctuación afecta a la calidad de los datos obtenidos en los modernos instrumentos analíticos para análisis de trazas y ultratrazas.

 

El Hospital agradece a Merck Millipore por su contribución editorial con este artículo.

 

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